动物源性食品中兽药的检测方法

　　兽药是畜牧业为提高动物抗病性而经常采用的药物，兽药的使用能显著提高畜牧业创造的经济价值，因此兽药的滥用较为常见，尤其是抗生素的滥用成为严重的社会问题之一。抗生素使用和细菌耐药性是互相依存、互相制约的关系，细菌耐药非正常增加，往往是抗生素的非正常使用的结果。早在1920-30年青霉素问世时，DrFleming就提出了青霉素的耐药性问题。随着科技的进步，新药物层出不穷，耐药性菌株也纷至沓来。抗生素的副作用以及耐药菌株的存在将严重威胁着人类的健康，因此国家出台一系列法规来规范兽药的合理使用，而建立快速、便捷、高通量的检测方法对满足日益增长的监管需求具有重要意义。

　　1、酶联免疫吸附测定

　　酶联免疫吸附测定法（ELISA）是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。通过酶分子与抗体或抗体分子共价结合，酶标记的抗体或抗原可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型，出现颜色反应。因此，可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应，颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比，从而达到定量检测的目的。

　　酶联免疫吸附测定具有选择性强、灵敏度高、检出限低等特点，ELISA试剂盒是时下广泛采用的快速检测方法，ELISA试剂盒检测限为0.25μg/kg，回收率为82.5%～91.0%。该方法操作简便、快速、灵敏度高，可以用于日常动物源性样品的快速检测。

　　2、色谱/质谱法

　　色谱法是利用在固定相和流动相之间相互作用的平衡场内物质行为的差异，从多组分混合物中使单一组分互相分离，继而进行定性检出和鉴定、定量测定和记录的分析方法。质谱法是使试样中各组分在离子源中发生电离，生成不同荷质比的带电荷的离子，经加速电场的作用，形成离子束，进入质量分析器。在质量分析器中，再利用电场和磁场使发生相反的速度色散，将它们分别聚焦而得到质谱图，从而确定其成分。色谱/质谱检测是目前常用的高效分析方法，具体方法有气相色谱法、液相色谱法、超临界流体色谱法、毛细管电泳、质谱法、薄层色谱等。将色谱与质谱串联的联用技术具有分离效果好、灵敏度高、检出限低、回收率高、重现性好等优点，通过多重反应监测扫描模式可减少基质干扰、提高准确性、避免假阳性和假阴性现象。

　　3、光谱法

　　光谱分析法是根据物质的光谱来鉴别物质及确定其化学组成和相对含量的方法，其中分光光度计是最常见的光谱分析仪，分光光度法是在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性或定量分析。随着科学研究的需要，一种非破坏性的样品定量分析技术近红外光谱与拉曼光谱应运而生，具有快速、操作简单、样品少、不消耗化学试剂、不污染环境等优点。光谱分析法需要大量参比数据，因此参比数据的精度也影响着光谱分析法的精度。

　　4、生物传感器与芯片

　　生物传感器与生物芯片法是具有广阔前景的兽药检测技术，生物传感技术是以生物活性单元作为敏感单元，对目标物进行选择性分析的的技术。生物芯片是根据生物分子间的特异相互作用，实现对特异成分的检测。生物传感器与生物芯片法都是通过特异性反应成分的差异，与ELISA相比靶标更多、特异性更强、结果更为准确。

　　抗生素种类繁多，对于检测方法具有相对适应性，目前的检测方法多具有“靶向”性，因此，便捷准确的ELISA、生物传感器和生物芯片法将更有助于抗生素等兽药的快速检测。