《葡萄酒中原花青素的测定 液相色谱法》等2项团标征求意见

按照宁夏化学分析测试协会团体标准工作程序，标准起草组已完成《贺兰山东麓葡萄酒中原花青素的测定 液相色谱法》、《贺兰山东麓葡萄酒中多种非食用着色剂的测定 液相色谱-质谱/质谱法》两项团体标准征求意见稿的编制工作。现按照协会《团体标准制修订程序》要求，公开征求意见，意见反馈邮箱1904691657@qq.com，截止时间2022年2月18日。

　　《贺兰山东麓葡萄酒中原花青素的测定 液相色谱法》

　　本标准按照 GB/T 1.1-2020 《标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则》规定编写。本标准由宁夏化学分析测试协会提出并归口。本标准起草单位：宁夏回族自治区食品检测研究院、宁夏工商职业技术学院、宁夏回族自治区 食品质量监督检验二站、宁夏化学分析测试协会。

　　本标准参考GB/T 6682 分析实验室用水规格和实验方法；GB/T 22244-2008 保健食品中前花青素的测定；DB65/T 4039-2017 黑果枸杞原花青素含量得测定 液相色谱法文件编制而成。本标准规定了贺兰山东麓葡萄酒中原花青素含量测定的高效液相色谱的方法。

　　方法原理：

　　试样经乙酸乙酯提取，旋蒸浓缩至干，以甲醇定容，应用高效液相色谱法测定，经 C18色谱柱 分离，以保留时间定性，外标法定量。

　　仪器和设备：

　　1.高效液相色谱仪：配有二极管阵列检测器。 2.旋转蒸发仪。 3.超声波清洗器。 4.分析天平：感量0.1mg 和 0.01g。5.离心机：最大转速10000r/min。 6.纯水仪。7.涡旋混合器。

　　试样制备：

　　将所取原始样品 1kg 在瓷混样桶内充分混匀，将混匀样品置于洁净容器内密封，作为试样，并 标明标记。

　　试样的提取：

　　准确称取 10g(精确到 0.01g)试样于 50mL 聚四氟乙烯离心管内，分别加入 20mL 乙酸乙酯， 涡旋混匀 1min，超声提取 10min 后，5000r/min 离心 5min，取上层全部提取液转移至鸡形瓶中，重 复上述操作，合并两次提取液，40℃旋转浓缩至近干，用甲醇溶解并定容至 10mL，取 1mL 样液经 0.22μm 微孔滤膜过滤，待液相分析。

　　本标准适用于贺兰山东麓葡萄酒(包括白葡萄酒、红葡萄酒)中原花青素的测定。

　　《贺兰山东麓葡萄酒中多种非食用着色剂的测定 液相色谱-质谱/质谱法》

　　本标准按照 GB/T 1.1-2020 《标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则》规定编写。本标准由宁夏化学分析测试协会提出并归口。本标准起草单位：宁夏回族自治区食品检测研究院(国家市场监管重点实验室(枸杞和葡萄酒 质量安全))、宁夏工商职业技术学院、宁夏回族自治区食品质量监督检验二站、宁夏化学分析测 试协会。

　　本标准参考GB/T 6682 分析实验室用水规格和实验方法；GB/T 23496-2009 食品中禁用物质的检测 碱性橙染料 高效液相色谱法；SN/T 4523-2016 出口葡萄酒中多种非法着色剂的测定 液相色谱-质谱/质谱法文件编制而成。本标准规定了贺兰山东麓葡萄酒中碱性橙 2、碱性嫩黄 O、碱性橙 21、碱性橙 22、柑橘红 2 号 5 种非食用着色剂的液相色谱质谱检测方法。

　　方法原理：

　　方法提要 液体试样经乙腈提取后，用无水硫酸镁、乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)净化后，氮吹至干，定容 后经 C18色谱柱分离，供液相色谱-质谱仪测定和确证，外标法定量。

　　仪器和设备：

　　1.液相色谱-串联质谱仪：配备电喷雾离子源(ESI)。 2.分析天平：感量 0.1mg 和 0.01g。3.涡旋混合器。 4.离心机：最大转速 10000r/min。 5.氮吹仪：可温控。6.超声波发生器。

　　试样制备：

　　将所取原始样品 1kg 在瓷混样桶内充分混匀，将混匀样品置于洁净容器内密封，作为试样，并 标明标记。

　　试样的提取：

　　称取试样 10.0 g(精确到 0.01g)于 50 mL 聚四氟乙烯离心管中，加入 3g 无水硫酸镁、1.5g 氯化 钠，再加入 10mL 乙腈，涡旋混匀 1 min，超声提取 10 min，8000 r/min 离心 5 min，吸取上清液， 残渣再用 10 mL 乙腈重复提取 1 次，合并上清液，混匀，8000 r/min 离心 5 min，上清液待净化。吸 取 8 mL 上述混合提取液加入内含 900mg 无水硫酸镁、150mg 乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)的 15mL 塑料离心管中净化，涡旋混匀 1 min，8000 r/min 离心 5 min，取 1mL 净化液，用小流速氮气吹至近 干，加入 1mL 初始流动相，涡旋混匀，过 0.22μm 微孔滤膜，用于测定。

　　定量测定：

　　根据样液中被测物含量情况，选定浓度相近的基质混合标准工作溶液，基质混合标准工作溶液 和待测样液中 5 种非食用着色剂的响应值均应在仪器检测的线性范围内。基质混合标准工作溶液与 样液等体积进样测定。标准溶液及样液均按 6.3.1 和 6.3.2 规定的条件进行测定，如果样液中与标准 溶液相同的保留时间有峰出现，则对其进行确证，碱性橙 2、碱性嫩黄 O、碱性橙 21、碱性橙 22、 柑橘红 2 号的参考保留时间见表 2。碱性橙 2、碱性嫩黄 O、碱性橙 21、碱性橙 22、柑橘红 2 号标 准品的多反应监测(MRM)色谱图参见附录 B，采用基质溶液标准曲线外标法定量。

　　本标准适用贺兰山东麓葡萄酒(包括白葡萄酒、红葡萄酒)中碱性橙2、碱性嫩黄O、碱性橙21、碱性橙22、柑橘红2号的测定和确证。