非洲猪瘟的检测方法

　　近日，多家大型食品企业的产品被曝检出非洲猪瘟病毒，引起社会广泛舆论。自2018年8月辽宁省沈阳市发生首例非洲猪瘟疫情后，疫情范围在逐渐扩大，对我国养猪业的影响逐渐显现。首先要强调的是，非洲猪瘟不是 "人畜共患病"，中国动物卫生与流行病学中心副主任黄保续强调："世界卫生组织、联合国粮农组织、世界动物卫生组织等国际组织既没有把非洲猪瘟列入人畜共患病，也没有列入多种动物共患病。非洲猪瘟发现以来近一百年历史，全球范围内没有出现人感染非洲猪瘟的情况，所以大家可以放心地消费食用经过检疫的猪肉。"专家也指出，非洲猪瘟在60℃环境下20min即可杀灭，不会造成健康问题。非洲猪瘟之所以要高度重视，在于对生猪养殖业的打击，猪肉对于我国是刚性需求产品，因此对生猪疫情的控制关乎国家的稳定。

　　非洲猪瘟病毒最早于 1921 年在非洲东部肯尼亚首次被发现，随后一直控制在撒哈拉以南的非洲国家。1957 年病毒从非洲的安哥拉传到欧洲的西班牙，1971 年病毒从西班牙传入南美洲的古巴，南美洲和拉丁美洲的多数国家陆续暴发疫情。2007 年病毒传入欧亚接壤的高加索地区，随后开始向俄罗斯南部地区扩散流行。截止目前，全球有37个国家和地区向世界动物卫生组织报告发生非洲猪瘟疫情，其中13个国家已经根除，根除时间多为5-36年，防控形势严峻。

非洲猪瘟为何难以控制？

　　非洲猪瘟病毒基因组全长 170～190 kb，为有囊膜的双链 DNA 病毒，病毒粒子大小为 175～215 nm，呈正二十面体结构，也是的虫媒DNA病毒。非洲猪瘟病毒是一种急性、热性、高度接触性传染病，引起猪的死亡率可达100％，并且非洲猪瘟具有潜伏期，即使感染病毒，但没有临床症状，就有可能通过非实验室检验技术关卡流入市场，进而导致下游食品企业相关问题的出现。

非洲猪瘟的检测方法

　　非洲猪瘟与传统猪瘟相似且综合症状复杂难辨，临床上类似于急性猪瘟，表现为高热、皮肤充血、流产、水肿和脏器出血。我国因之前不属于非洲猪瘟疫情国家，因此没有相关的针对性研究，目前采用的是原农业部检疫所于1997年与美国梅岛动物病研究所共同研究的检测方法，主要是PCR和ELISA，标准遵循GB/T 18648-2002非洲猪瘟诊断技术。

　　随着相关检测技术的发展，对于非洲猪瘟的检测方法也更加完善。PCR技术是目前最简单、快速的分子学检测方法，但该方法的敏感性有限，因此以PCR为基础的更新方法应运而生。

　　1、荧光定量 PCR 方法，该方法是将光谱技术引入到PCR 反应中，通过荧光信号的强弱变化定量测定特异性扩增产物的量，解决了常规 PCR 方法敏感性低和电泳检测中溴化乙锭对环境的污染问题。

　　2、等温扩增法，该方法是一种新兴的分子生物学检测方法，等温扩增方法不需要 PCR 中的变性、退火步骤，即可完成对靶序列的循环扩增，大幅缩短了时间，整个扩增反应时间一般少于 60 min，而常规PCR 方法的反应时间一般需要 2 h 以上。等温扩增试剂盒适合现场检测，灵敏度高，能够大幅提高猪瘟防控的可行性。

　　ELISA是目前常用的免疫学诊断技术，但作为血清学检测技术，具有一定的滞后性，但对于疫情的流行学防控具有重要意义。胶体金试纸检测方法是一种快速的免疫检测技术，能够快速检测病毒的存在，适宜猪瘟的前期防控。

　　近日，农业农村部制定印发了《非洲猪瘟疫情应急实施方案（2019版）》，进一步稳固我国非洲猪瘟的可控程度。当下的形式对下游食品生产企业是严峻的考验，除了要严格控制原料的来源，更要加强自身检验水平的提高，确保产品的安全、稳定。