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在食物中的牛磺酸测定方法有什么?牛磺酸是一种重要的氨基酸,具有很重要的作用。作为添加剂,已广泛用于药物与食品中,具有进一步推广使用的前景。
【牛磺酸在食物中的测定方法有什么?】
膳食中牛磺酸的主要来源是动物性食品,它是动物机体内含量最丰富的自由氨基酸,牛磺酸广泛存在于所有动物的组织、细胞内,特别是神经、肌肉和腺体中的含量较高,以海洋生物中含量为。
目前测定食品中牛磺酸有一些主要方法,包括荧光法、氨基酸自动分析法、薄层色谱法、高效液相色谱法(HPLC)及衍生化高效液相色谱法、异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生法、OPA(邻苯二甲醛)柱前衍生法、DNFB(2,4-二硝基氟苯)柱前衍生化法、OPA柱后衍生法、离子交换法等。
以下我们主要讲高效液相色谱法和薄层色谱法这两种测定方法:
1、高效液相色谱法利用的原理是牛磺酸经提取后,用衍生剂衍生,衍生剂经C18柱分离,于其吸收波长330nm检测,根据保留时间和峰面积进行定性测量。
测定步骤:采用甲醇流动相对系,在适宜的色谱条件下,牛磺酸可获得较好的分离,并且在8ug/ml~40ug/ml浓度范围内与峰面积成良好的线性关系,峰面积定量的相对标准偏差为0.7%(n=5),牛磺酸的PITC衍生物溶表室温存放36h不变质。
2、薄层色谱法利用的原理是将样品中牛磺酸经离子交换柱提纯后,以薄层色谱法做定性、定量实验。
测定步骤:制备离子交换柱对样品进行预处理后开始测定。制备薄层板、点样、展开、显色,根据样品Rf值进行定性,根据斑点大小及颜色深浅进行半定量测定。
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